银河国际官网线粒体提取试剂盒（组织和细胞通用）
线粒体制备试剂盒 (Mitochondria Isolation Kit)用于从组织或培养细胞中分离线粒体和细胞胞浆成分。加入分离溶液，匀浆破碎组织细胞，经过数次800g和12000g离心，在60分钟内即可分离出完整的线粒体和胞浆成分。制备的线粒体具有很高的生物学活性，可进行各种功能研究如酶学测定，更可用于Western Blot、2D-胶、线粒体蛋白或DNA提取、蛋白质组学等研究。
严格按照说明操作，总是能制备获得高纯度线粒体。一篇方法学研究论文发现，用普利莱试剂盒制备线粒体的得率、活性、纯度优于蔗糖密度梯度离心法和Invotrogen/Pierce线粒体提取试剂盒方法。
1.组织匀浆：100~200mg新鲜组织如肝、脑、肾、心肌等，剪为0.5cm2 碎块放入小容量玻璃匀浆器内。估计组织块总体积。加入1.5ml冰预冷的Mito
培养细胞匀浆：800×g 5min离心收集细胞。单次提取需2-5×107个细胞。加入1.5ml冰预冷Mito Solution重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃
2.将匀浆液转移到离心管中，800×g，4ºC离心5min。（胞核、膜碎片、未裂解细胞等在管底，弃去）
4.将上清液转移到新的离心管。10,000×g离心10min 4 ºC。线粒体沉淀在管底。离心后的上清含胞浆成分，可收集用于对照实验。
5.洗涤线ml Mito Solution，轻弹管底重悬线ºC。弃上清，线.重悬线粒体：可以用Mito Solution重悬线粒体沉淀，也可以用合适后续实验的自备缓冲液来裂解线粒体沉淀，具体用量是：约每100mg组织提取的
1.制备高质量线粒体的关键：第一，全程低温操作，将样品管放在冰水浴而不是碎冰块中；第二，快速，微量制备比大规模制备操作更快速，更容易
获得完整的线粒体，且得率高；第三，在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞是制备线粒体的最关键环节。破碎效果与组织细胞类型有关；与组织块相
比，贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁。用1-3ml小容量玻璃匀浆器(而不是破碎装置)上下研磨培养细胞20-30次。玻璃匀浆器
须配套选用间隙严密的研杵，其特征是将研杵插入匀浆器套管后，可提起研杵而套管不会脱落。正确的匀浆不是旋转研杵，而是上下缓慢推拉研
杵，研杵推进和提升过程中细胞遭受压力的剧变而破碎。研磨程度可用相差显微镜进行检查当未裂解细胞在~50%即可。过度研磨会破坏线粒体，而研
磨不足将降低线.如果不得不用电动匀浆器(polytron)，可选用6500转，刀头上下进出4次共计10秒。不同的电动匀浆器性能差别甚大，除非步步监测，否则分离结果
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